＋▽＋ 原因：(1)DH5α感受态细胞生长速度较慢；(2)涂板菌液太多，菌落过多，导致菌落生长速度慢/菌落小。方案：(1)延长菌的生长时间；(2)建议减少菌液涂布量，剩下的菌液可放4℃保存，对于低通量的细菌转化，单管包装的化学感受态细胞可以直接进行热激，可避免因反复冻融造成的转化效率降低。对于中通量的细菌转化，可选择预装入联管中的感受态细胞，再借助多通道移液器
?﹏? 3、感受态细胞制备及转化中的影响因素⑴、细胞的生长状态和密度最好从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接，及贮存在4https://zymoresearch/media/amasty/amfile/attach/_T3001_T3002_Mix_Go_E._coli_
转化效率与外源DNA 的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA 的量过多或体积过大时，转化效率就会降低。1ng 的cccDNA 即可使50μl 的感受态细胞达到饱和感受态细胞转化效率的高低与哪些因素有关：1．细菌的生长状态：实验中应密切注视细菌的生长状态和密度，尽量使用对数生长期的细胞（一般通过检测OD600来控制.DH5α
1.低温制备感受态，再通过42度热激转化可以通过改变细胞膜的收缩和扩张促进质粒DNA进入大肠杆菌（有效转入把质粒转化到感受态细胞，在含有抗生素的平板上和不含抗生素的平板上培养，结果不含抗生素的平板上长的都是菌，含抗生素的平板上啥都没长，这是什么原因。生物化学与分子生物学
╯０╰ 原因：(1)DH5α感受态细胞生长速度较慢；(2)涂板菌液太多，菌落过多，导致菌落生长速度慢/菌落小。方案：(1)延长菌的生长时间；(2)建议减少菌液涂布量，剩下的菌使用[5]。因此，对感受态细胞制备方法进行合理优化是提高转化效率的关键。2 材料与方法2.1 材料与仪器2.1.1 菌种及质粒PCI-Neo-hTERT 质粒、大肠杆菌DH5α 由天津农学院动物科学系分子育种中
